Jornal de Ciência e Terapia Celular
Acesso livre
ISSN: 2157-7013
ISSN: 2157-7013
Jitendra Kumar Chaudhary e Pramod C Rath
As células estaminais mesenquimais (MSCs) são fusiformes, aderentes, clonogénicas, não fagocíticas, fibroblásticas e multipotentes por natureza, com capacidade intrínseca de autorrenovação e proliferação. A medula óssea é a fonte mais rica de CTM para estudar os processos subjacentes de proliferação, auto-renovação e diferenciação de múltiplas linhagens. Têm sido vários os estudos para melhorar o método de isolamento, propagação, caracterização e diferenciação de células estaminais mesenquimais da medula óssea de ratinhos, mas nenhum é amplamente aceitável. Devido à indisponibilidade de um método universalmente aceitável de cultura de CTM, estão a ser feitos esforços contínuos neste sentido. Aqui, relatamos um método simples com algumas modificações subtis com o objetivo de melhorar o método global de isolamento, cultura, propagação e diferenciação de CTMs in vitro. Seguindo este protocolo, isolamos as CTM com morfologia típica em forma de fuso, como mostrado pela microscopia eletrónica de varrimento. Estas células apresentaram também expressão de marcadores específicos de CTM, CD29 (98,94% ± 0,67%), CD44 (84,27% ± 7,77%), Sca-1 (92,70% ± 3,81% ) com expressão insignificante de marcadores específicos de HSC, como CD45 (0,40% ± 0,10%), CD34 (0,15% ± 0,05%) e CD11b (0,45% ± 0,15%). Verificou-se também que as CTM se diferenciam em linhagens mesodérmicas, como adipócitos, osteócitos e condrócitos, bem como células ectodérmicas semelhantes a neurónios. Além disso, as CTMs apresentaram uma expressão basal diferencial de fatores de transcrição associados à pluripotência, como o Oct4, Nanog, Sox2 e Myc. Com base nos resultados acima, propomos um protocolo simples que pode ser utilizado para isolar, cultivar, propagar e caracterizar CTM multipotentes da medula óssea de ratinhos para fins experimentais e de aplicação.