Jornal de Oftalmologia Clínica e Experimental
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Abstrato

Perfis alterados de expressão e metilação do ADN do gene ERCC6 no tecido do cristalino da catarata cortical relacionada com a idade

Yong Wang, Guowei Zhang, Fei Li, Lihua Kang, Jindong Ben, Han Rong e Huaijin Guan

O dano no ADN induzido por ultravioleta (UV) é atribuído à patogénese da catarata relacionada com a idade (ARC) e é reparado através da reparação por excisão de nucleótidos (NER). Sabe-se que a proteína do grupo B de complementação da síndrome de Cockayne (CSB) codificada pelo ERCC6 é um componente do complexo NER. A metilação do ADN é um dos principais eventos epigenéticos e é catalisada pelas ADN 5-citosina-metiltransferases (DNMTs). Este estudo teve como objetivo examinar a potencial contribuição da metilação do ADN das ilhas CpG na região promotora do ERCC6 nos tecidos do cristalino para a patogénese do ARC. Foram incluídas neste estudo 15 lentes ARC do tipo cortical e quinze lentes transparentes de seres humanos. A expressão de ERCC6 e DNMTs nas lentes foi analisada por qRT-PCR e western blot. A PCR com sequenciação de bissulfito (BSP) foi realizada para avaliar o estado de metilação do ERCC6. Uma experiência in vitro adicionando um agente desmetilante 5-aza-2’-desoxicitidina (5-aza-dC) no epitélio B-3 do cristalino humano (HLE B-3) foi conduzida para confirmar o papel da metilação do ADN na expressão de ERCC6 . Os resultados mostram que os níveis de mRNA e proteína de ERCC6 foram significativamente reduzidos nos LECs e no córtex do cristalino dos ARCs. O mRNA de DNMT3b foi significativamente maior nos LECs dos ARCs do que nos controlos. No grupo ARC, a ilha CpG na região promotora do ERCC6 apresentou hipermetilação nos LECs em comparação com os controlos. Após o tratamento com 5-aza-dC, o nível proteico de ERCC6 aumentou no HLE B-3. Concluímos que a sobreexpressão de DNMT3b no cristalino está associada à hipermetilação da ilha CpG de ERCC6, que está ligada à expressão reduzida de ERCC6 em LECs de doentes com ARC. Esta alteração epigenética no gene ERCC6 pode ser um fator de formação de ARC que é mediado pelo comprometimento da reparação do ADN.