ISSN: 2155-9899
Charlene D. Young e Jonathan B Angel
O estudo de timócitos humanos requer uma matriz apropriada para permitir a função adequada dos timócitos. Embora as células OP9-DL1 tenham sido bem estabelecidas como um sistema de cocultura ideal para a geração de células T a partir de seus progenitores; sua capacidade de suportar uma população mista de timócitos humanos maduros para estudos de infecção por HIV in vitro ainda não foi estabelecida. Avaliamos os efeitos da cocultura de uma população heterogênea de timócitos humanos maduros com uma linhagem celular derivada de camundongo (OP9) transduzida com o ligante notch delta like 1 (OP9-DL-1) e comparamos isso à cocultura padrão com células epiteliais tímicas humanas (TEC). A cocultura de timócitos com células OP9-DL1 resultou em maior viabilidade e menor apoptose quando comparada às coculturas de TEC. A distribuição do subconjunto e a expressão de CD127 dos timócitos variaram ligeiramente entre as condições. Timócitos co-cultivados com células OP9-DL1 tiveram uma proporção menor de células CD3 + DP e uma proporção maior de células SP4 em comparação com co-culturas TEC. As células maduras CD3 + CD4 + CD8 - (SP4) também tiveram níveis mais baixos de expressão de CD127 em culturas OP9-DL1 quando comparadas com TEC. A estimulação de timócitos com interleucina-7 resultou em uma diminuição na expressão de CD127 em co-culturas OP9-DL1, como observado anteriormente com co-culturas TEC. Timócitos co-cultivados com OP9-DL1 tenderam a ter níveis mais altos de fosforilação de STAT-5 induzida por IL-7 e tiveram níveis mais altos de expressão de Bcl-2 induzida por interleucina-7. As células OP9-DL1 fornecem um microambiente que é permissivo à infecção por HIV em timócitos in vitro . A cocultura de timócitos com OP9-DL1 facilitará o estudo de timócitos humanos e auxiliará no estudo de estímulos exógenos ou infecção em subconjuntos individuais de timócitos.