Jornal de Ciência e Terapia Celular
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Abstrato

Aplicação da hipoxia para estabelecer modelos de transição epitelial-mesenquimal em linhagens celulares de carcinoma de células renais

Baoan Hong, Changhua Zhou, Xin Du, Siqi Chen, Xiaohu Deng, Shayiremu Duoerkun, Qing Li, Yong Yang, Kan Gong e Ning Zhang

Objectivo: Estabelecer modelos de transição epitelial-mesenquimal (EMT) em linhagens celulares de carcinoma de células renais por hipoxia induzida por CoCl2.
Materiais e métodos: As linhagens celulares de carcinoma de células renais A498 e 786-O foram utilizadas na experiência e o CoCl2 foi utilizado para simular a hipoxia. As células cancerígenas foram cultivadas com diferentes concentrações de CoCl2. Foram detetadas alterações morfológicas e de citoatividade para obter a concentração ótima de CoCl2 para simular a hipoxia. Após o tratamento com CoCl2, as células foram submetidas a análise de Western blot para testar a expressão de HIF-1α e as alterações de moléculas relacionadas com a EMT (E-caderina, fibronectina).
Resultados: As conjunções celulares dos grupos tratados com CoCl2 estavam soltas e dispersas em comparação com o controlo. O efeito do CoCl2 na viabilidade das células A498 não foi distinto numa dosagem baixa, mas quando a concentração de CoCl2 atingiu 250 mM, a atividade celular diminuiu gradualmente. Em contraste, o CoCl2 induziu a proliferação das células 786-O na gama de 50 mM a 200 mM, mas inibiu o crescimento celular em dosagens superiores a 200 mM. A expressão da E-caderina foi significativamente regulada negativamente, e a fibronectina foi regulada positivamente nas linhas celulares A498 e 786-O sob hipoxia simulada por CoCl2 em comparação com condições normóxicas ( P <0, 01).
Conclusões: Os modelos EMT de linhagens celulares de carcinoma de células renais foram estabelecidos com sucesso por hipoxia induzida por CoCl2. Os modelos ajudar-nos-ão a estudar ainda mais os mecanismos da EMT e a investigar novos alvos terapêuticos para inibir a invasão tumoral e a metástase.