Jornal de Ciência e Terapia Celular
Acesso livre

Abstrato

Caracterização da estratégia de entrega de genes de lipofecção facilitada pela albumina sérica humana

Robert W Arpke e Pi-Wan Cheng

Reportamos a caracterização de uma estratégia de lipofecção facilitada, que emprega uma formulação preparada com albumina sérica humana, DMRIE-C e pCMV?. Os complexos de transfecção na formulação de lipofecção contendo albumina foram caracterizados quanto ao tamanho por dispersão de luz, tráfego intracelular por microscopia confocal e mecanismo de captação por inibidores. A suplementação da formulação de DMRIE-C mais pCMV? com albumina aumenta a eficiência da lipofecção em 8-9 vezes e o tamanho dos complexos em 2-2,5 vezes, medido por dispersão de luz. A análise do tráfego intracelular dos complexos de transfecção por microscopia confocal revela co-localização do ADN e da albumina no citoplasma e no núcleo. O pré-tratamento das células com clorpromazina ou excesso de albumina, citocalasina B ou complexos de filipina resulta na inibição da eficiência de transfecção em 20%, 55% ou nenhuma, respetivamente. Os resultados sugerem um envolvimento moderado da clatrina, um envolvimento significativo da macropinocitose associada à actina e nenhum envolvimento das cavéolas na captação dos complexos de transfecção preparados com albumina sérica humana, DMRIE-C e pCMV?.