ISSN: 2155-9899
Shailendra K Verma, Lalit Batra, Thimmasandra N Athmaram, Prachi Pathak, Navya Katram, Gauri S Agrawal e Urmil Tuteja
Yersinia pestis , agente causador da peste, é um dos patógenos mais mortais do mundo. A resposta imune inata é a primeira linha de defesa do hospedeiro contra patógenos. Aqui, investigamos a resposta imune inata e adaptativa em camundongos infectados pela peste, os níveis de expressão gênica de TLR1-9 e CD14, MyD88, NF-ĸB, TNF-α, MAPKp38, IL-1β foram estudados em macrófagos peritoneais de camundongos infectados pela peste de forma dependente do tempo (0 h, 24 h, 48 h, 72 h, 96 h e 120 h após a infecção) por qRT-PCR. Também avaliamos a resposta imune às proteínas externas de Yersinia (Yops) em camundongos infectados por Y. pestis . Genes selecionados (11 números) de Y. pestis que codificam fatores virulentos, a saber, YpkA, YopH, YopM, antígeno V, Pla, YopN, YopJ, YopE, YopK, F1 e antígeno pH6 foram amplificados por PCR, clonados e expressos em Escherichia coli . Para estudar o nível de IgG e seus isótipos, ELISA e imunoblotting foram realizados usando antígenos recombinantes purificados. Os principais antígenos reconhecidos pelos soros infectados com peste murina foram o antígeno V, YopH, YopM, YopE, F1, mas uma imunorreação muito fraca foi observada no caso de Pla. Observamos uma diferença significativa nos isótipos de IgG (IgG1, IgG2a, IgG2b e IgG3) para o antígeno V e F1, enquanto no caso de YopH e YopE (IgG1 e IgG2b) apenas. Também observamos aumento significativo na expressão de CD14 48 h após a infecção, TLR4 e MyD88 72 h após a infecção em macrófagos peritoneais de camundongos infectados por Y. pestis . Nossas descobertas sugerem que tanto as respostas imunes inatas quanto as humorais são cruciais para a proteção.