ISSN: 2471-9315
Elham Omer Mahgoub1*, Galal M. Abdella
O gene do capsídeo VP1 é essencial para expressar uma proteína que permite o diagnóstico da infecção pelo vírus da anemia das galinhas (CAV) em bandos de galinhas. Neste estudo, o vetor de expressão procariótico pRSET–B expressou o gene VP1 em E. coli Top10. A proteína VP1 foi expressa em E. coli TOP10 como uma proteína de fusão solúvel. A solubilidade da proteína VP1 ativa o epítopo imunogênico para torná-lo facilmente detectado usando um anticorpo monoclonal anti-VP1 a 50 kDa. O processo de fermentação em lote foi usado para aumentar a produção da proteína VP1 em E. coli. Como resultado, a proteína VP1 recombinante aumentou com sucesso o rendimento da proteína VP1 expressa durante a cultura de alta densidade de células bacterianas. A diálise e a dessalinização aumentaram a atividade específica e o rendimento final da fração da proteína VP1 quando a etapa de Filtração de Fluxo Tangencial (TFF) foi usada. O cálculo estatístico dos testes ELISA indiretos e comerciais indicou que o ELISA indireto pode competir com os testes comerciais com menor quantidade de solução, menores custos e maior especificidade. A proteína VP1 expressa em cultura bacteriana de fermentação em batelada foi testada como um antígeno para detectar anticorpos para CAV em galinhas infectadas usando o Ensaio Imunoabsorvente Enzimático (ELISA) indireto desenvolvido.