Revista de Métodos de Diagnóstico Médico
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Abstrato

Desenvolvimento de um novo dispositivo de deteção de dermatófitos utilizando imunocromatografia

Wakamoto H, Miyamoto M

Fundamento: O método de avaliação para o diagnóstico da tinea unguium é principalmente a microscopia. Foram desenvolvidos novos anticorpos monoclonais antidermatófitos que reconhecem o antigénio polissacárido da parede celular dos fungos filamentosos, incluindo os dermatófitos, e aplicam-no à imunocromatografia . Alguns cientistas concentraram-se nesta tecnologia, melhoraram-na e determinaram que este método de teste fornecia informações úteis para o diagnóstico da tinea unguium através da análise de um grande número de amostras clínicas. No entanto, estes estudos foram realizados por um método experimental.

Objectivo: Estabelecer a utilização desta tira de ensaio para uso clínico e a certificação da estabilidade durante o armazenamento a longo prazo.

Métodos: Vários fungos e bactérias foram cultivados e extraídos por tampão de extração para avaliar a reatividade e o intervalo de medição dos dermatófitos. O Trichophyton rubrum foi utilizado como antigénio de controlo de qualidade, e os limites de deteção foram estabelecidos em 0,5 μg/ml como positivo fraco e numa concentração de 100 vezes (50 μg/ml) como positivo forte. As amostras de unhas, que já tinham sido identificadas como positivas ou negativas pelas tiras de teste, foram selecionadas aleatoriamente, cortadas em pedaços finos e misturadas. Foram preparadas amostras de unhas padrão positivas e negativas.

Resultados: Foram obtidos resultados positivos ou negativos nas linhas de teste durante 5 a 60 minutos a 1 a 30°C. Os limites de deteção de 7 amostras secas de dermatófitos foram de 0,3 a 3 μg/ml. Os resultados de reatividade mostraram que 8 dos dermatófitos foram positivos. Por outro lado, a tira de teste não reagiu às espécies Malassezia ou Candida e às estirpes bacterianas. Alguns Aspergillus, Penicillium e Fusarium, que geralmente não são microbiota residente que habita as unhas de pessoas saudáveis, apresentaram uma reação positiva. Os agentes antifúngicos terbinafina, griseofulvina e itraconazol não afetaram os resultados. Todos os 3 lotes de tiras de teste cumpriram os padrões estabelecidos pelo método de controlo de qualidade após terem sido mantidos armazenados a 30°C até 22 meses.

Conclusão: Um dispositivo de deteção de dermatófitos recentemente desenvolvido foi fácil de utilizar, deu resultados rápidos e elevada reprodutibilidade, e foi estável durante 22 meses a 30°C.