Katalin Gombos, Miklos Oldal, Kristztina Ildiko Kalacs, Kristztina Godony, Akos Varnagy, Jozsef Bodis e Gabor L Kovacs
Histórico: Análise de PCR digital por gotículas de meios de cultura embrionários humanos coletados em um estudo de prova de conceito sobre o resultado da gravidez de fertilização in vitro. O miR-191-3p foi analisado em meios de cultura embrionários humanos usados de embriões morfologicamente semelhantes e de boa qualidade que, após transferência posterior, desenvolveram-se em embriões reprodutivamente competentes e neonatos saudáveis ou daqueles em que ocorreu aborto espontâneo no estágio inicial da gravidez. Métodos: Meios de cultura usados no estágio mórula-blastocisto (3º dia) foram coletados de embriões fertilizados com ICSI e submetidos à transferência de embriões. Após o resultado da gravidez registrado, 40 amostras do grupo de embriões reprodutivamente competentes, 40 amostras de aborto espontâneo e suas amostras paralelas de meios de cultura em branco foram inscritas na análise de miRNA. O isolamento e a detecção quantitativa de miRNA de meios de cultura embrionários foram realizados em uma plataforma automatizada de reação em cadeia da polimerase digital por gotículas. Resultados: A análise quantitativa e a avaliação ANOVA confirmaram que o miR-191-3p estava presente em concentração significativamente maior no meio de cultura do 3º dia de embriões humanos reprodutivamente competentes (diferença média de concentração = 20.478, p = 1 × 10-4) do que o aborto espontâneo. O meio de cultura em branco de controle foi negativo para miR-191-3p. Conclusão: o miR-191-3p presente no meio de cultura de blastocisto humano indica origem embrionária real e mudou nos padrões de expressão dependendo do resultado clínico após a transferência. Pode ser um marcador molecular candidato para avaliação pré-implantação da competência reprodutiva do embrião de forma não invasiva.