Jornal de Imunologia Clínica e Celular
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Abstrato

Mycobacterium tuberculosis induz expansão de células T CD4 positivas para Foxp3 com perfil regulatório em indivíduos saudáveis ​​não sensibilizados à tuberculina: implicações para a imunização eficaz contra a TB

Christina S Hirsch, Roxana Rojas, Mianda Wu e Zahra Toossi

Objetivo: A infecção por MTB ou a exposição aos constituintes do MTB está associada à intensa estimulação microbiana do sistema imunológico, por meio de componentes antigênicos e TLR, e à indução de um meio rico em citocinas pró-inflamatórias/anti-inflamatórias. Aqui, abordamos a base da expansão de células T regulatórias induzidas (iT-reg) em resposta à estimulação por MTB, na ausência de responsividade prévia ao antígeno de células T.
Métodos: PBMC de indivíduos controle TST negativo e TST positivo não infectados por HIV-1 foram estimulados por lisado MTB H37Rv virulento (L), uma preparação de prensa francesa de MTB que inclui todos os componentes bacterianos. O fenótipo do iT-reg induzido por MTB H37RvL foi avaliado usando imunocoloração e citometria de fluxo. A capacidade funcional do iT-reg foi avaliada usando a incorporação de ³ H-timidina e a produção de IFNγ de células T não aderentes (NAC) na presença ou ausência de iT-reg em sobrenadantes de cultura correspondentes em resposta à estimulação de TCR. A PCR em tempo real foi usada para avaliar a expressão de mRNA de IDO e FoxP3.
Resultados: A capacidade do MTB H37RvL de induzir células T CD4 ⁺ CD25 ^hi+ Foxp3 ⁺ em PBMC de indivíduos TST negativos foi robusta (p < 0,001) e, de fato, comparável à indução de iT-reg em PBMC de indivíduos TST positivos. Os CD4 ⁺ CD25 ^{hi + T-reg induzidos} por MTB foram TGFβ positivos (p < 0,05). Além disso, o MTB H37RvL induziu a incorporação de ^{3 H} -timidina e a produção de IFNγ de células T não aderentes (NAC) em resposta à estimulação de TCR . A indução de iT-reg por MTB H37RvL foi significativamente mais forte (p<0,01) do que por ligantes TLR-2, TLR-4, TLR-9 ou combinação de todos os ligantes TLR. A expressão de mRNA de indoleamina 2,3-didesoxigenase (IDO) induziu MTB H37RvL em monócitos (p<0,001), e a cocultura com o inibidor de IDO, D-1MT, diminuiu as frequências de T-reg (p<0,05). A inibição de TGFβ por siRNA reduziu a expressão de mRNA de Foxp3 em células T CD4 (p<0,05). Conclusão: Portanto, MTB e seus componentes expandem iT-reg funcional em células mononucleares humanas de indivíduos não sensibilizados por MTB. Além disso, a expansão de iT-reg induzida por MTB depende da expressão de fagócitos mononucleares de TGFβ e IDO.