Jornal de Ciência e Terapia Celular
Acesso livre

Abstrato

Formação de ligação célula a célula entre células da medula óssea e cardiomiócitos isolados de rato num modelo de co-cultivo

Josef Skopalik, Michal Pasek, Milan Rychtarik, Zdenek Koristek, Evagabrielova, Peter Scheer, Peter Matejovic, Martinmodriansky e Martin Klabusay

Objectivos: O potencial regenerativo limitado dos cardiomiócitos (CMs) provoca alterações irreversíveis no tecido cardíaco durante os processos patológicos. No entanto, as células mononucleares da medula óssea (BM-MNCs) podem migrar para este tecido, incorporar-se na área de miócitos mortos ou ausentes e melhorar a função cardíaca global. O mecanismo de incorporação e interação dos BMMSCs com os CMs não é claro. O nosso objetivo foi criar um modelo in vitro que permitisse estudar a interação dos BM-MNCs com os CMs e fazer uma descrição microscópica destas interações.

Métodos e Resultados: Os CM foram isolados de ratos adultos e recém-nascidos. As BM-MNCs foram isoladas da medula óssea. As BM-MNCs foram adicionadas à cultura de miócitos. A adesão célula a célula e a expressão de Cx43 foram avaliadas por microscopia de fluorescência, os transientes de Ca2+ foram avaliados na comunicação cardiomiócito-BMC sob estimulação elétrica por medição de fluorescência fluo-4. A análise do transporte de calceína dos BM-MNCs para os CMs foi realizada através de microscopia de fluorescência.

Conclusões : A adesão dos BM-MNCs aos MCs ocorreu rapidamente e foi estável. O Cx43 foi detetado em zonas de contacto entre BM-MNCs e CMs; pares que apresentaram positividade para Cx43 representaram menos de 1% de todos os pares BM-MNC-cardiomiócitos em co-cultura. Estruturas condutoras entre CMs e BM-MNCs foram formadas e verificadas por imagem de transferência de calceína e transientes síncronos de Ca2+.