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Abstrato

Perfil de expressão génica e vias de sinalização em células de cancro da mama MCF-7 mediadas pela sobreexpressão da acil-Coa sintetase 4

Ana F Castillo, Ulises D Orlando, Paula Lopez, Angela R Solano, Paula M. Maloberti e Ernesto J Podesta

Objectivo: O cancro da mama compreende um grupo heterogéneo de doenças que variam em morfologia, biologia, comportamento e resposta à terapêutica. Estudos anteriores identificaram um padrão de expressão génica da acil-CoA sintetase 4 (ACSL4) correlacionado com tumores muito agressivos. Em particular, utilizámos o sistema Tet-Off de tetraciclina para transfectar de forma estável células MCF-7 de cancro da mama não agressivo e desenvolvemos uma linha estável que sobre-expressa ACSL4 (MCF-7 Tet-Off / ACSL4). Como resultado, comprovámos que a transfecção celular apenas com ADNc de ACSL4 produz um fenótipo altamente agressivo in vitro e resulta no desenvolvimento de tumores em crescimento quando injectado em ratinhos nus. No entanto, e apesar do consenso generalizado sobre o papel do ACSL4 na mediação de um fenótipo agressivo no cancro da mama, os primeiros passos através dos quais o ACSL4 aumenta o crescimento e progressão tumoral foram pouco descritos e necessitam de maior elucidação. Por este motivo, o objetivo deste trabalho foi estudar o perfil de expressão génica e as vias de sinalização desencadeadas pela sobreexpressão de ACSL4 no mecanismo que leva a um fenótipo agressivo no cancro da mama.

Métodos: Realizamos uma abordagem massiva de sequenciação de mRNA em profundidade e um array de proteínas de fase reversa utilizando células MCF-7 Tet-Off/ACSL4 como modelo para identificar a expressão génica e assinaturas proteómicas funcionais específicas para a sobreexpressão de ACSL4.

Resultados e Conclusão: A única expressão de ACSL4 apresenta um transcriptoma distinto e um perfil proteómico funcional. Além disso, as redes genéticas reguladas de forma mais significativa nas células do cancro da mama que sobre-expressam ACSL4 estão associadas à regulação do desenvolvimento embrionário e tecidual, ao movimento celular e à replicação e reparação do ADN. Em conclusão, o ACSL4 é um regulador a montante das vias tumorigénicas. Uma vez que um fenótipo tumoral agressivo surge nas fases iniciais da progressão metastática, os mediadores previamente desconhecidos do ACSL4 podem