Jornal de antivirais e antirretrovirais
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Abstrato

Terapia genética utilizando um fragmento variável de cadeia única secretado dirigido ao CCR5 para inibir a infeção pelo VIH

Alexander Falkenhagen, Masoud Ameli, Sabah Asad, Stanley E Read e Sadhna Joshi

A interação do VIH R5 com o CCR5 celular é obrigatória para a entrada nas células do hospedeiro. O anticorpo monoclonal humanizado PRO 140 mascara o CCR5 da superfície celular e bloqueia eficientemente a infeção pelo VIH R5. Embora tenha sido demonstrado que as administrações semanais de PRO 140 reduzem drasticamente a carga viral nos doentes, as injeções frequentes de anticorpos purificados não são práticas nem económicas. A engenharia de células ou tecidos modificados por genes para secretarem proteínas terapêuticas em locais de replicação viral pode substituir vantajosamente a administração continuada do medicamento. Desenhámos um gene que codifica um fragmento variável de cadeia única secretado de PRO 140, sscFvPRO140, e utilizámos um vetor lentiviral para a sua entrega e expressão. O sscFvPRO140 foi efetivamente secretado a partir de células modificadas por genes, permaneceu estável no sobrenadante da cultura a 37°C e ligou-se especificamente às células que expressam CCR5. Foram realizados ensaios de infeção de ronda única para avaliar a inibição da infeção pelo VIH. O sscFvPRO140 reduziu a entrada do VIH R5 nas células-alvo não modificadas, embora com uma potência mais baixa em comparação com o que foi reportado para o anticorpo monoclonal original. A entrada do VIH X4, que utiliza o CXCR4 como co-receptor, manteve-se inalterada. Além disso, a entrada viral foi substancialmente reduzida quando as células alvo do VIH modificadas por genes que expressam sscFvPRO140 foram infetadas. A terapia genética utilizando moléculas intracelularmente ativas, como as ribozimas ou as nucleases de dedo de zinco, apenas confere proteção às células-alvo modificadas por genes. Em contraste, a estratégia de terapia genética proposta baseada em proteínas anti-VIH secretadas tem o potencial de proteger as populações de células alvo do VIH modificadas por genes, bem como as não modificadas.