Medicina Interna: Acesso Aberto
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Abstrato

Engenharia genética de bactérias que podem produzir urato oxidase

Xin Cheng, Bo Yang, Dong Liu, L Juan He, Gan Chen, Yong Chen, R Fa Huang e Y Sheng Jiang

O gene da urato oxidase foi clonado em Lactobacillus bulgaria para produzir urato oxidase para decompor ácido úrico e tratar hiperuricemia. Usando as sequências do gene da urato oxidase Candida utilis (uricase, E12709) no GenBank, fragmentos do gene da urato oxidase amplificados por PCR foram inseridos no plasmídeo pMG36e para construir o plasmídeo recombinante PMG36e-U, que foi então eletrotransformado em Lactobacillus bulgaria. Usamos SDS-PAGE para identificar a urato oxidase nos lisados ​​celulares das bactérias geneticamente modificadas e para medir a atividade da urato oxidase. O gene da urato oxidase foi amplificado por PCR a partir do genoma Candida utilis. O plasmídeo recombinante PMG36e-U contendo o gene da urato oxidase foi eletrotransformado com sucesso em Lactobacillus bulgaria. O peso molecular da subunidade da urato oxidase sintetizada pela bactéria geneticamente modificada foi de aproximadamente 34 KD com base em SDS-PAGE, e a atividade enzimática in vitro da preparação da bactéria foi de até 0,33 u/mL. Conclusão: O gene da urato oxidase foi clonado em Lactobacillus bulgaria e decompôs o ácido úrico com sucesso.