Química Orgânica: Pesquisa Atual
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Abstrato

Codificação Geneticamente de Grupos Funcionais Bioortogonais para Rotulagem de Proteínas Seletivas de Local

Wei Wan, Yane-Shih Wang e Wenshe R. Liu

A marcação seletiva de proteínas é uma abordagem indispensável na atualmente intensa área de investigação em biologia química. Os estudos que envolvem a marcação seletiva de proteínas vão desde a análise dinâmica de proteínas in vitro até à investigação da interação proteína-proteína em células vivas. Na última década, foram introduzidos vários métodos para obter a marcação de proteínas seletivas ao local. Estes incluem a fusão genética de proteínas verdes fluorescentes e seus derivados, a marcação química seletiva de proteínas com etiquetas de fusão e a modificação específica do local de aminoácidos não canónicos que são geneticamente codificados. Utilizando pares de tRNA supressores de aminoacil-tRNA sintetase ortogonais evoluídos, aminoácidos não canónicos com grupos funcionais bioortogonais, como azida, alcino, tetrazina, alceno, ceto, fenilaleto, etc., foram geneticamente incorporados em proteínas em E. coli, levedura e células de mamíferos. A codificação genética destes aminoácidos não canónicos permite múltiplas maneiras de marcação de proteínas seletivas ao local, tanto in vitro como in vivo , permitindo diversas estratégias para interrogar as funções das proteínas. Esta revisão pretende fornecer uma breve introdução à técnica genética de incorporação de aminoácidos não canónicos e aos progressos recentes na aplicação desta técnica para obter a marcação de proteínas com sítio selectivo.