Jornal de Ciência e Terapia Celular
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Abstrato

A proteína de choque térmico (HSP) 72 entra nos primeiros endossomas preparatórios para a libertação celular

Punit Kaur e Alexzander Asea

Objectivo: Estabelecer o mecanismo pelo qual a hipertermia induz a libertação de Hsp72 em péptidos específicos de tumores para entrega às células apresentadoras de antigénio (APC). Materiais e métodos: Células 4T1 scrb-shRNAGFP e Hsp72-shRNAGFP foram injetadas na almofada mamária de um ratinho BALB/c fêmea para cinética de temperatura de ratinhos expostos a HT utilizando o conjunto de banho de água circulante e hipertermia mediada por nanoshell. A expressão de Hsp72 intracelular induzida pelo calor e basal foi medida por imunotransferência com anti-Hsp72. Quatro horas após o tratamento com hipertermia (HT), a co-localização da Hsp72 foi determinada utilizando inibidores e os exossomas foram recuperados do sobrenadante e os níveis de Hsp72 foram medidos. O tamanho do tumor foi medido após hipertermia. Resultados: Neste estudo, mostramos que a Hsp72 libertada se encontra sob duas formas: 1) em exossomas altamente imunologicamente ativos, conhecidos por serem enriquecidos em complexos principais de histocompatibilidade (MHC) de classes I e II, moléculas coestimulatórias (CD40, CD80, CD86) e especificamente membros da família HSP70 (incluindo Hsp72, Hsp73, Hsp75, Grp78) e da família HSP90 (incluindo Hsp82, Hsp90, Grp96, Grp98) e, 2) como Hsp72-PC, em que a Hsp72 livre acompanha peptídeos específicos de tumor. Além disso, mostrámos que a exposição de tumores portadores de 4T1 à hipertermia (41°C, 60 min) induz uma regressão tumoral significativa (p<0,05) em comparação com os ratinhos portadores de 4T1 mantidos à temperatura ambiente (25°C, 60 min). . No entanto, a injeção repetida de ratinhos portadores de tumor 4T1 com anticorpo anti-Hsp72 anulou a regressão tumoral induzida pela hipertermia. Amostras de sangue colhidas em vários momentos confirmaram que o anticorpo bloqueador reduziu significativamente os níveis plasmáticos de Hsp72. Conclusões: Os nossos resultados sugerem que a hipertermia estimulou a regressão tumoral, em parte, estimulando a libertação de Hsp72 dos tumores, que é absorvida pela APC preparatória para ativar as respostas citotóxicas dos CTL CD8+ contra os tumores. Uma vez que as HSP são encontradas em todos os organismos celulares, é provável que sejam aplicáveis ​​à prevenção/tratamento de doenças de animais relevantes para a agricultura. Espera-se que contribua para uma compreensão mais ampla das vias de tráfico intracelular como abordagem terapêutica.