Jornal da Leucemia
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Abstrato

Células-tronco mesenquimais amnióticas humanas exibem capacidade imunossupressora semelhante às células-tronco mesenquimais da medula óssea e possuem maior atividade de proliferação e propriedades de células-tronco mais claras in vitro

Ya Gao,Ying Xu, Jie Song, Jia-qiong Hong, Wei-bin Zhuo, Chun-yan Yang, Yu Zhang, Zhi-ping Fan, Yan-wu Guo, Chun-yan Yue, Hai-tao Sun andBao-hong Ping

Objetivos: Células-tronco mesenquimais da medula óssea humana (hBMSCs) têm sido usadas para a prevenção e tratamento da doença aguda do enxerto contra o hospedeiro (aGVHD) em pacientes pós-transplante de células-tronco hematopoiéticas. Neste estudo, comparamos as características biológicas e a atividade imunossupressora de células-tronco mesenquimais amnióticas humanas (hAMSCs) e hBMSCs para fornecer evidências experimentais para o uso potencial de hAMSCs para tratar aGVHD, resolvendo assim o problema de fontes insuficientes de hBMSCs. Métodos: HAMSCs foram isoladas por digestão enzimática. hBMSCs foram isoladas usando gradientes de densidade Ficoll-Hypaque. As características biológicas de ambos os tipos de células-tronco foram comparadas por análise morfológica, análise de crescimento celular, perfil do ciclo celular, imunofenotipagem e ensaios de imunofluorescência. Uma cocultura in vitro de MSCs e células mononucleares do sangue periférico (PBMCs) foi realizada e a proliferação de linfócitos foi medida usando o ensaio Cell Counting Kit-8 (CCK-8). A produção de IFN-γ foi determinada no sobrenadante da cocultura usando o ensaio imunoenzimático (ELISA). Resultados: Tanto hAMSCs quanto hBMSCs tinham morfologia semelhante à de fibroblastos. hAMSCs puderam ser mantidas por pelo menos 15 passagens de cultura, mas hBMSCs começaram a mostrar sinais de envelhecimento e proliferação notavelmente reduzida em 6-7 passagens. Não houve diferença significativa na proporção de células na fase G2/M entre hAMSCs e hBMSCs (P>0,05). A imunofenotipagem revelou expressão positiva de CD105, CD90 e CD73 e expressão negativa de CD34, CD45, CD11b, CD19 e HLA-DR na superfície de hAMSCs e hBMSCs. hAMSCs foram positivas para Oct-3/4, mas hBMSCs não foram. Tanto hAMSCs quanto hBMSCs expressaram vimentina. A proliferação de PBMCs estimulada por PHA foi inibida por hAMSCs e hBMSCs. Essa inibição foi mais forte, pois a proporção de MSCs aumentou. Não houve diferenças significativas entre os efeitos inibitórios dos dois tipos de MSCs na proliferação de PBMCs (P>0,05). A produção de interferon-γ (IFN-γ) foi menor quando PBMCs foram cocultivadas com hAMSCs ou hBMSCs do que quando foram cultivadas sozinhas (P<0,05). A produção de IFN-γ foi menor quando PBMCs foram cocultivadas com hAMSCs do que quando foram cocultivadas com hBMSCs (P>0,05). Conclusão: Os resultados deste estudo demonstraram que hAMSCs têm maior atividade de proliferação e propriedades de células-tronco mais claras do que hBMSCs. Tanto hAMSCs quanto hBMSCs foram capazes de suprimir a proliferação de linfócitos alogênicos do sangue periférico e reduzir a secreção de IFN-γ estimulada por PHA in vitro.