Jornal de antivirais e antirretrovirais
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Abstrato

Anticorpos Fab monoclonais humanos contra o vírus do Nilo Ocidental e a sua atividade neutralizante analisados ​​in vitro e in vivo

Tao Duan, Monique Ferguson, Lintian Yuan, Fangling Xu e Guangyu Li

A progressão da doença com infeção pelo vírus do Nilo Ocidental (WNV) em humanos leva à meningite ou encefalite e pode causar a morte, principalmente entre idosos e indivíduos imunocomprometidos. A imunidade passiva com recurso a imunoglobulinas demonstrou eficácia no tratamento de alguns doentes com infecção por WNV, o que torna significativo o desenvolvimento de anticorpos humanos anti-WNV. O objetivo deste estudo foi construir uma biblioteca de display de fagos específica para Fab contra WNV e identificar e selecionar clones com atividades neutralizantes. O RNA total foi extraído dos linfócitos do sangue periférico (PBLs) de dois indivíduos imunizados, e o RT-PCR foi utilizado para amplificar os fragmentos Fab contendo as cadeias pesada (VH) e leve (VL). Os genes amplificados foram clonados sequencialmente no vetor de expressão de anticorpos recombinantes pComb3-H, e a biblioteca de apresentação de fagos específica para Fab foi empacotada com o fago auxiliar VCS-M13. Foram realizadas cinco rondas de selecção com o domínio III da proteína E do WNV e depois os anticorpos de ligação foram seleccionados por ELISA.