Andrologia-acesso aberto
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Abstrato

Identificação de diferenciação de células semelhantes a células-tronco espermatogoniais in vitro de pacientes com azoospermia usando meio de células-tronco embrionárias humanas modificadas (HESC)

Azantee YAW, Lokman MI e Roszaman R

Histórico: A espermatogênese é um processo onde ocorre a proliferação e diferenciação de células-tronco espermatogoniais (SSC) em células espermáticas haploides no testículo. Pacientes com azoospermia apresentam espermatogênese prejudicada, onde têm dificuldade de obter espermatozoides normais. O objetivo deste estudo é proliferar e diferenciar células semelhantes a SSC em cultura in vitro de amostras de pacientes com azoospermia e determinar o padrão de expressões gênicas envolvidas. Métodos e resultados: Tecido de biópsia testicular obtido de pacientes com azoospermia obstrutiva (OA) e azoospermia não obstrutiva (NOA) foi dissociado e cultivado em diferentes meios de células-tronco embrionárias humanas (HESC) adicionados com fatores de crescimento específicos e hormônios reprodutivos de acordo com o dia da cultura usando placas de 24 poços. Colônias de células semelhantes a SSC foram formadas após 5 semanas de cultura. As análises de expressão gênica foram feitas no dia 49 e no dia 90 usando reação em cadeia da polimerase de transcrição reversa quantitativa (q-RT PCR). OCT4 foi detectado em paciente NOA e ITGB1 foi identificado em paciente OA por 49 dias de cultura. A expressão gênica para todos os estágios de células espermatogênicas no dia 90 foi detectada principalmente em paciente OA; ITGB1, SCP3, H2B e TNP1. No entanto, o gene TNP1 foi expresso apenas em paciente NOA com estágio de formação de espermátides. Conclusões: Nosso resultado mostrou que há potencial para desenvolver cultura de espermatozoides in vitro a partir de biópsia de testículo de pacientes azoospérmicos para posterior aplicação clínica.