Jornal de Ciência e Terapia Celular
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Abstrato

Teste de biocompatibilidade in vivo de um transportador de células de colagénio semeado com células uroteliais humanas em ratos

Lisa Daum, Sabine Maurer, Martin Vaegler e Karl-Dietrich Sievert

O urotélio autólogo estabilizado por matriz e modificado por engenharia de tecidos é uma nova opção para a reconstrução uretral, particularmente para doentes para os quais não estão disponíveis outros enxertos autólogos. A engenharia in vitro do tecido urotelial requer biomateriais como transportadores de células que aumentam a estabilidade dos implantes baseados em células. O objetivo deste estudo foi investigar um novo transportador celular à base de colagénio bovino tipo I (CCC) altamente padronizado e fabricado industrialmente quanto à sua adequação como matriz transportadora para células uroteliais humanas (HUC). Como teste de biocompatibilidade in vivo, o comportamento e a degradação destes implantes deveriam ser comprovados num modelo de rato nu. O HUC expandido de biópsias de tecido foi analisado fenotipicamente por imunocitoquímica e semeado em CCC. Para aplicação in vivo, o CCC foi semeado com HUC marcado com PKH26 a alta densidade e as construções foram implantadas no músculo reto abdominal de ratos nus. A integração, a sobrevivência celular e a degradação dos implantes de matriz de urotélio foram estudadas após 1, 2 e 4 semanas. A caracterização imuno-histológica das construções de matriz de urotélio multicamada foi realizada para AE1/AE3 e p63 (fenótipo epitelial), CK20 (diferenciação) e E-caderina e ZO-1 (formação de junção). A coloração imunocitoquímica mostrou um carácter urotelial das células isoladas e ausência de fibroblastos e células musculares. Em doze ratos nus, os implantes de matriz de urotélio integraram-se bem no tecido do hospedeiro onde não foi observada inflamação. A análise de imunofluorescência confirmou o fenótipo epitelial, a adesão e a formação de junções estreitas, a formação homogénea de multicamadas de culturas HUC estratificadas, bem como o fenótipo urotelial e a diferenciação in vitro, a matriz CCC revelou adicionalmente uma biocompatibilidade promissora investigada num modelo de rato nu. Assim, este estudo demonstra uma excelente adequação do CCC como matriz para células uroteliais e recomenda a sua utilização num modelo animal de grande porte no que diz respeito à aplicação clínica.