Avanços em Ética Médica
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Abstrato

Supressão de genes mediada por microRNA in vivo em peixe-zebra

Khaled Sayeed

Devido à abundância de genes ortólogos que codificam proteínas comparáveis ​​às encontradas em humanos, o peixe-zebra (Danio rerio) surgiu como um modelo promissor para o estudo de doenças humanas. O genoma do peixe-zebra só pode ser modificado com um pequeno conjunto de ferramentas, e muitos dos métodos atualmente em uso são bem-sucedidos nos estágios iniciais do desenvolvimento (como a tecnologia antisense baseada em morfolino) ou são conduzidos fenotipicamente sem fornecer knockdown de gene específico (como mutagênese química). O uso de interferência de RNA tem sido controverso porque efeitos fora do alvo podem dificultar a interpretação de resultados fenotípicos. Esse problema foi resolvido desenvolvendo linhagens de peixe-zebra com construções de miRNA que são integradas de forma estável e têm como alvo o gene de interesse desejado. Neste estudo, demonstramos que uma configuração de teste de sensor eGFP in vivo temporário comercialmente, a estrutura principal do miRNA é bem-sucedida na produção de knockdown de eGFP em peixe-zebra. Decidimos usar essa técnica para knockdown de transcrições associadas à síndrome do QT longo, uma doença cardíaca humana.