Pedro Timms
As populações de coalas selvagens continuam a sofrer graves declínios como resultado de vários factores ameaçadores, incluindo: perda de habitat, traumatismos com veículos motorizados, ataques de cães e doença por clamídia. As infeções por clamídia estão associadas a doenças que vão desde doenças oculares que levam à cegueira, bem como doenças do trato urinário e genital, que levam à infertilidade feminina. A modelização mostra que o combate à doença por clamídia teria um impacto importante na estabilização do declínio populacional. Os nossos estudos anteriores demonstraram que os coalas podem ser imunizados com segurança com uma vacina contendo uma mistura de antigénios da proteína principal da membrana externa da clamídia (MOMP) combinada com um regime subcutâneo de dose única ou de três doses. Recentemente, num ensaio de campo em grande escala da vacina, vacinámos 30 coalas que eram aparentemente clinicamente saudáveis, mas ou PCR para clamídia negativo ou PCR para clamídia positivo, e acompanhámo-los durante 1-2 anos para avaliar o efeito protector da vacina ( comparação com um grupo de controlo de coalas não vacinados). Observámos respostas imunitárias fortes, específicas e duradouras nos coalas vacinados; respostas de títulos elevados de anticorpos (medidos por ELISA e também neutralização in vitro), bem como respostas de citocinas específicas para a clamídia (interferon-gama e IL-17 em particular). Observámos também proteção contra a progressão para doença clínica nos animais vacinados. Também conduzimos um pequeno ensaio para vacinar animais que já apresentam sinais clínicos de doença ocular. Em vez da prática normal de administração de antibióticos (cloranfenicol, diariamente durante 28 dias, que perturba gravemente o microbioma intestinal do animal), vacinamos quatro animais com uma dose única, a vacina 3-MOMP A deteção do vírus foi realizada utilizando 44 esfregaços nasofaríngeos . Cerca de 57% dos soros inspeccionados laboratorialmente mantiveram-se positivos para imunoglobulina M e 95% dos toalhetes foram positivos para PCR com transcriptase reversa. A análise filogenética das sequências obtidas a partir de 30 amostras de zaragatoa mostrou a circulação de duas variantes do genótipo D8, mas nenhuma estirpe do genótipo D4, como detetado em 2007. Para todos os animais vacinados, a carga de PCR da clamídia diminuiu, muitas vezes para zero, e em pelo menos dois animais, observámos uma diminuição do score clínico da doença. Estes resultados são promissores para o desenvolvimento futuro de uma vacina eficaz contra a clamídia para utilização em coalas em cativeiro e também selvagens.As populações de coalas selvagens continuam a apresentar níveis significativos de infeção por C. pecorum e, como resultado, sofrem de doenças debilitantes, que ameaçam a sua sobrevivência a longo prazo. Em muitas populações, estes níveis de infecção e doença são, na realidade, mais elevados do que os anteriormente relatados e as actuais opções de tratamento mostram pouco ou nenhum impacto no declínio do nível de infecção e doença, com os registos de internamentos hospitalares a permanecerem estáveis ao longo do tempo. A implementação generalizada de uma vacina em coalas selvagens poderá oferecer a protecção necessária para inverter esta progressão. Até à data, os ensaios anteriores de vacinas com a proteína rMOMP realizados em populações de coalas selvagens infectadas e doentes foram muito bem sucedidos. Estes ensaios demonstraram que uma vacina proteica rMOMP estimula o sistema imunitário e é responsável por um aumento de anticorpos neutralizantes. Os coalas vacinados apresentaram uma diminuição da sua carga infecciosa por clamídia, bem como do estado da doença ocular, pós-vacinação e, mais importante, os coalas selvagens vacinados com rMOMP apresentaram também uma diminuição da progressão da doença ao longo de um período de 12 meses. No entanto, apesar deste sucesso, existem muitos desafios na produção e implementação de uma vacina em formato de proteína recombinante em maior escala. Uma vacina sintética baseada em péptidos poderá ultrapassar alguns destes desafios, assumindo que induz uma resposta imunitária forte e relevante. O desenvolvimento de uma vacina anti-clamídia baseada em péptidos que possa provocar respostas imunitárias iguais ou até mais fortes do que a actual vacina MOMP de C. pecorum, com potencial para ser produzida em massa, seria um candidato ideal para o futuro desenvolvimento de vacinas anti- -clamídia . Neste estudo, mostramos que uma vacina composta por dois peptídeos relativamente curtos, derivados do MOMP completo, é capaz de induzir uma resposta imunitária nos coalas até 26 semanas após a vacinação. Mostrámos uma resposta de anticorpos IgA da mucosa ao rMOMP (G) de comprimento total, tanto nos coalas vacinados com o peptídeo MOMP como com a proteína MOMP. A infeção e a doença por clamídia são endémicas em coalas de vida livre. Os antibióticos continuam a ser o tratamento de primeira linha para a clamídia nos coalas, apesar das taxas de falha do tratamento e dos resultados adversos da disbiose intestinal. Nas apresentações mais graves da doença que requerem intervenção antibiótica, o efeito da vacinação durante o uso de antibióticos não é atualmente conhecido. Este estudo investigou se uma resposta imunitária produtiva poderia ser induzida pela vacinação de coalas durante o tratamento com antibióticos para a cistite induzida por Chlamydia. Os níveis plasmáticos de anticorpos IgG contra a principal proteína da membrana externa de C. pecorum (MOMP) diminuíram durante o tratamento com antibióticos em coalas vacinados e não vacinados. Pós-tratamento, os níveis de IgG foram recuperados. Os anticorpos IgG de coalas vacinados e naturalmente infectados reconheceram uma maior proporção da proteína MOMP em comparação com os seus homólogos não vacinados e naturalmente infectados. Adicionalmente,a expressão génica das células mononucleares do sangue periférico revelou uma regulação positiva nos genes relacionados com a desgranulação de neutrófilos em coalas vacinados durante o primeiro mês pós-vacinação. Estas descobertas mostram que a vacinação de coalas enquanto estão a ser tratados com antibióticos para cistite pode resultar na geração de uma resposta imunitária produtiva, sob a forma de aumento e expansão da produção de IgG.