Jornal de antivirais e antirretrovirais
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Abstrato

Isolamento e diagnóstico molecular do vírus Orf a partir de pequenos ruminantes e humanos no Egito

Gamil SG Zeedan, Abeer M Abdalhamed, Nahed H Ghoneim e Alaa A Ghazy

O vírus ORF de ovinos e caprinos é um dos vários parapoxvírus zoonóticos. O diagnóstico molecular e serológico do vírus ORF fornece métodos de alta sensibilidade para um diagnóstico preciso e rápido da infeção pelo vírus Orf em ovinos, caprinos e humanos no Egito. O presente trabalho teve como objectivo isolar e caracterizar o vírus Orf isolado de ovinos, caprinos e humanos e determinar a eficácia da actividade antiviral da Negilla Sativa. Todas as amostras de biópsia de humanos e animais foram preparadas e inoculadas em membranas corioalantóicas de ovos embrionados de galinha para isolamento do vírus. O vírus isolado foi identificado e caracterizado por ensaio imunoenzimático, técnica de anticorpos fluorescentes, microscopia eletrónica e reação em cadeia da polimerase. O vírus isolado apresenta fluorescência verde específica. A micrografia mostrou partículas de forma ovóide com 290-300 × 160 nm de diâmetro e fragmentos do produto de PCR (gene B2L) de aproximadamente 592 pb que são semelhantes ao vírus Orf de referência. Os anticorpos positivos para o vírus Orf nas amostras de soro por ELISA de proteína A, as amostras positivas foram 4 em 3, 9 em 29 e 18 em 48. Além disso, por IFAT foram 3 em 39, 6 em 29 e 12 em 48 e por AGPT foram de 1 em 39, 5 em 29 e 7 em 48 em humanos, caprinos e ovinos na província de Beni-suef, Egito, respetivamente. O efeito do vírus ORF tratado com o óleo essencial de Negilla Sativa sobre o vírus Orf reduziu o título de infectividade do vírus de 6,9 ​​​​Log10 para 1,5 Log10 por EID 50/0,2 ml. Os vírus Orf sensíveis ao efeito da temperatura de 37°C e 56oC/6h apresentaram uma redução do título do vírus em graus variáveis. Concluiu-se que o PCR e o ELISA da proteína A se mostraram mais rápidos, simples e sensíveis para detecção da infecção pelo vírus ORF em humanos e animais, o óleo essencial de Negilla Sativa possui efeito antiviral contra o vírus Orf mas ainda necessita de extensas pesquisas para análise de composição química para detetar princípio ativo.