Jornal de Imunologia Clínica e Celular
Acesso livre

Abstrato

miR-24 regula a polarização e plasticidade dos macrófagos

Jezrom B. Fordham, Afsar R. Naqvi e Salvador Nares

Objetivo: MicroRNAs (miRNA) são reguladores onipresentes da biologia e imunidade humanas. Anteriormente, demonstramos um papel inibitório para miR-24 na fagocitose de biopartículas de Escherichia coli e Staphylococcus aureus e a indução da secreção de citocinas em resposta ao lipopolissacarídeo (LPS) da mesma origem; também, identificamos respostas divergentes e convergentes de miRNA ao LPS dos patógenos periodontopáticos Aggregatibacter actinomycetemcomitams (Aa) e Porphyromonas gingivalis (Pg), e revelamos o extrato de fumaça de cigarro como um modificador ambiental da estrutura do LPS de Pg (Pg CSE) impactando as respostas de miRNA de macrófagos. Este estudo foi projetado para investigar o papel do miR-24 na polarização e plasticidade de macrófagos.

Métodos: Macrófagos humanos primários foram diferenciados de monócitos CD14+ isolados de células mononucleares do sangue periférico (PBMCs) por seleção positiva de MACS e transfetados com mimetizadores de miRNA miR-24, inibidores ou mimetizador de controle negativo; seguido por estimulação com citocinas e/ou LPS sob várias condições representando estágios-chave da ativação de macrófagos. A ativação e polarização de macrófagos foram avaliadas usando ensaios para produção de citocinas (ELISA) e expressão de proteínas (citometria de fluxo, imunoblot). A expressão de miR-24 foi avaliada por RT-PCR.

Resultados: A estimulação de macrófagos com LPSs de origem Aa, Pg e Pg CSE resultou em níveis diferentes de expressão de citocina e expressão diferencial de miR-24. A superexpressão de miR-24 inibiu a secreção de citocina em resposta a LPS. A preparação de macrófagos com interferon gama (IFN-γ) não superou esse efeito inibitório, mas a ativação clássica de macrófagos com IFN-γ mais TNF-α, TNF-β ou IL-17 modulou o padrão de supressão mediada por miR-24 de uma forma específica de citocina. A superexpressão de miR-24 aumentou a regulação positiva de CD206 durante a ativação alternativa de macrófagos e inibiu sua regulação negativa em macrófagos em transição de estados de ativação alternativos para clássicos. A superexpressão de miR-24 resultou na expressão reduzida da subunidade p110 delta da PI 3-quinase de Classe 1A (p110δ).

Conclusão: Modificações específicas de patógenos e ambientes em LPS alteram a expressão de citocinas e miR-24 em macrófagos humanos. MiR-24 é um regulador negativo da ativação clássica de macrófagos por LPS e promove ativação alternativa sob condições de polarização e plasticidade. A inibição mediada por miR-24 da secreção de citocina induzida por LPS depende do estado de ativação do macrófago no ponto de estimulação, e isso pode ser devido ao grau em que p110δ está envolvido na(s) via(s) de sinalização intracelular(es) que transduzem a ligação do receptor em indução de citocina. Embora diferenças importantes tenham sido observadas no efeito de miR-24 em macrófagos, esses dados indicam que a superexpressão de miR-24 seria predominantemente anti-inflamatória.