Jornal de Ciência e Terapia Celular
Acesso livre

Abstrato

(PARP) -1 fragmento N-Terminal regula a expressão e atividade endógena de PARP-1 e sensibiliza as células para o stress oxidativo

Ida Raquel Rajiah

A poli (ADP-ribose) polimerase-1 (PARP-1) é uma enzima nuclear que desempenha um papel vital na reparação do ADN. Isto torna-o um alvo terapêutico anticancerígeno atraente. É ativado por quebras de ADN e catalisa a síntese de homopolímeros de ADP-ribose a partir de NAD+. Os inibidores competitivos, bem como o domínio não catalítico de ligação ao ADN da PARP-1, abolem a sua função de síntese de polímeros. Tais inibidores da PARP-1 têm sido utilizados em ensaios clínicos e são conhecidos por causarem náuseas, fadiga e acontecimentos hematológicos e, com utilização crónica, aumentam o risco de danos no ADN induzidos por fármacos e tumorigénese. Neste estudo, investiguei o efeito do fragmento PARP-1-N-terminal na atividade e expressão endógena de PARP-1 em células de mamíferos. Para provocar uma resposta ao dano no ADN, foram utilizadas diferentes concentrações de H2O2. Para visualização dos efeitos por imagem ao vivo, o fragmento PARP-1-N-terminal de 750 pb foi marcado no vetor EGFPN1. Os meus dados mostram uma correlação inversa entre a expressão deste fragmento e a síntese de poli (ADP-ribose) a concentrações mais baixas de H2O2 e a indução de apoptose a concentrações mais elevadas. A minha evidência experimental também suporta a regulação da expressão endógena de PARP-1 pelo fragmento na ausência de danos no ADN. Esta construção permitiu a visualização da sua capacidade funcional de sensibilizar as células ao dano oxidativo e induzir a apoptose, como observado pela formação de precursores apoptóticos e produtos de clivagem de caspases em células vivas. Os dados também fornecem evidências diretas do seu potencial terapêutico em quimioterapia ou radioterapia para evitar a resposta inflamatória induzida pela necrose.