Jornal de Oftalmologia Clínica e Experimental
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Abstrato

Alterações induzidas pela pressão na expressão de PEDF e PEDF-R: implicações para a sinalização neuroprotetora no glaucoma

Sean J Lee, D'Anne S Duncan, Franklin D Echevarria, William M McLaughlin, Jeremy B Hatcher e Rebecca M Sappington

Introdução: As alterações na sinalização dos neurónios gliais estão implicadas no glaucoma, uma doença neurodegenerativa caracterizada pela morte das células ganglionares da retina (RGC). O fator derivado do epitélio pigmentar (PEDF) é uma proteína secretada com potenciais qualidades neuroprotetoras em doenças da retina, incluindo a hipertensão ocular crónica. Aqui procurou-se determinar se as elevações moderadas e de curto prazo da PIO alteram a sinalização do PEDF e se a sinalização do PEDF induzida pela pressão impacta diretamente a apoptose das RGC. Métodos: Na retina de ratinhos virgens e ratinhos com glaucoma unilateral induzido por microesferas, examinámos a expressão e a localização específica do tipo celular do PEDF e do seu recetor (PEDF-R), utilizando PCR quantitativo e imunohistoquímica. Utilizando culturas primárias de RGCs purificadas e células de Müller, examinámos a expressão específica do tipo celular de PEDF em resposta a 48 horas de pressão hidrostática elevada, utilizando ELISA multiplex e imunocitoquímica. Medimos também a apoptose de CGRs induzida por pressão na presença ou ausência de atglistatina, um inibidor potente e seletivo de PEDF-R, e de PEDF recombinante, utilizando ensaios TUNEL. Resultados: O PEDF e o PEDF-R são expressos constitutivamente na retina virgem, principalmente nas células ganglionares e nas camadas de fibras nervosas. A PIO elevada aumenta a expressão de PEDF e PEDF-R, particularmente associada aos RGCs e às células de Müller. A pressão elevada in vitro aumentou a secreção de PEDF em 6 vezes nas RGCs e tendeu para um aumento da expressão pelas células de Müller, em comparação com a pressão ambiente. Isto foi acompanhado por alterações na localização subcelular do PEDF-R em ambos os tipos de células. A inibição da sinalização do PEDF com atglistatina aumentou a apoptose induzida pela pressão nos RGC e o tratamento com PEDF recombinante inibiu a apoptose induzida pela pressão, ambos de forma dose-dependente. Conclusão: Os nossos achados sugerem que as elevações moderadas e de curta duração da PIO promovem a sinalização do PEDF através da regulação positiva do PEDF e do PEDF-R. Com base em estudos in vivo e in vitro, esta sinalização PEDF surge provavelmente tanto de células Müller como de RGCs, e tem o potencial de inibir diretamente a apoptose de RGCs.