Revista de Métodos de Diagnóstico Médico
Acesso livre
ISSN: 2168-9784
ISSN: 2168-9784
Satoru Kaneko*, Yuki Okada, Satoshi Yokota, Kiyoshi Takamatsu
Objectivos: O manual de referência da OMS para a andrologia considera o contorno da cabeça do espermatozóide como um parâmetro chave para avaliar a infertilidade masculina e classifica os vacúolos internos como defeitos da cabeça. As características dos vacúolos eram heterogéneas entre os interindividuais e também entre os espermatozóides. O presente estudo reportou algumas propriedades únicas do Azul Reativo 2 (RB2). O corante exibiu especificidade celular dependente do pH para os espermatozóides e espermátides humanas.
Materiais e Métodos: O esperma humano e a espermátide foram corados com RB2 a pH 10,0.
Resultados: O RB2 corou os espermatozóides humanos e as espermátides, que apareceram como corpos azulados translúcidos, mas não coraram os linfócitos, enquanto os vacúolos internos apareceram como manchas incolores. A coloração RB2 revelou também espermátides degradadas que sofreram protaminação, mas foram presas antes do alongamento da cauda. A maioria das amostras de sémen azoospérmico (16/23 casos) incluía espermatozóides ou espermátides degradadas. Embora as características do contorno da cabeça e dos vacúolos fossem heterogéneas entre os interindividuais, a coloração RB2 na presença de 2,0 mmol/L de Ditiotreitol reformulou universalmente o contorno numa forma oval e levou ao desaparecimento dos vacúolos, independentemente das suas características originais .
Conclusão: Três resíduos de sulfato em RB2 interagiram seletivamente com resíduos de guanidil em Arg de protaminas a pH 10. A especificidade celular deveu-se ao conteúdo de Arg das nucleoproteínas. O RB2 revelou o contorno da cabeça e os vacúolos internos dos espermatozóides e prendeu as espermátides que tinham sofrido protaminação. A falha local da ligação cruzada dissulfeto pode desempenhar um papel crítico na formação de vacúolos. A coloração RB2 abriu novos métodos para explorar a espermiogénese.