Jornal de antivirais e antirretrovirais
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Abstrato

Proteína Coree1e2 recombinante expressa em levedura de Pichia pastoris, uma vacina candidata para o vírus da hepatite C

Mehdi Fazlalipour, Hossein Keyvani, Seyed Hamid Reza Monavari e

Enquadramento: A infecção pelo vírus da hepatite C (HCV) é um grande problema de saúde tanto nos países desenvolvidos como nos países em desenvolvimento e a infecção pelo HCV é uma doença global transmitida pelo sangue que afecta quase 3% da população mundial com taxas de morbilidade e mortalidade. A eficácia do tratamento da hepatite C é pouco satisfatória e o desenvolvimento de uma vacina eficaz pode ser essencial no controlo da infecção pelo VHC. As proteínas E1 e E2, duas proteínas envelopadas fortemente glicosiladas, que podem provocar anticorpos neutralizantes contra a infecção por HCV no hospedeiro e as proteínas Core, E1 e E2 são as principais vacinas candidatas para vacinação e o ELISA é um dos testes de rotina que tem sido utilizado em clínicas. Objectivo: A evolução e o desenvolvimento gradual de uma vacina útil podem ser o ponto principal no controlo e erradicação da infecção pelo vírus da hepatite C (HCV). Estudos recentes têm reportado que as glicoproteínas do envelope do HCV podem induzir anticorpos neutralizantes contra o domínio antigénico do HCV. Por conseguinte, as proteínas do envelope do VHC são consideradas a principal vacina candidata contra o VHC. Métodos: Neste estudo, utilizámos o sistema de expressão de levedura Pichia pastoris para expressar a proteína CoreE1E2 recombinante do HCV, que consiste em Core (269 nt-841nt), E1 (842 nt-1417nt) e E2 (1418 nt-2506nt). A Pichia pastoris pode produzir níveis elevados de proteína CoreE1E2 recombinante do HCV. A proteína possui glicosilação e também pela otimização de códons baseada no sistema de expressão da pichia conseguimos aumentar a taxa de proteínas recombinantes. Além disso, a proteína purificada pode induzir eficientemente anticorpos anti-CoreE1E2 em coelhos, e também através do desenvolvimento de um kit ELISA caseiro podemos detetar anticorpos de doentes iranianos com VHC com genótipo 1a. Resultados: Embora pouco se saiba sobre o mecanismo de montagem do vírion da hepatite C, no nosso estudo as partículas semelhantes a vírus de rCoreE1E2 com um tamanho de 70 nm foram mostradas por microscopia eletrónica e comprovaram a automontagem in vitro no sistema de expressão de levedura. Conclusão: Estes resultados indicam que a glicoproteína CoreE1E2 recombinante é eficaz na indução de anticorpos neutralizantes e é uma candidata influente à vacina contra o VHC.