Jornal de Imunologia Clínica e Celular
Acesso livre
ISSN: 2155-9899
ISSN: 2155-9899
Zarina Arif, Mir Yasir Arfat, Jamal Ahmad, Asif Zaman, Shireen Naaz Islam e M Asad Khan
Objetivo: Estudar o papel da albumina sérica humana modificada com peroxinitrito (albumina nitroxidada) na artrite reumatoide. Métodos: A albumina sérica humana foi exposta ao peroxinitrito e as alterações na estrutura da albumina foram monitoradas por espectroscopia UV-visível, de fluorescência e de dicroísmo circular, tioflavina T, ligação ao vermelho Congo e espectroscopia infravermelha transformada de Fourier com reflexão total atenuada (ATR-FTIR). As propriedades antioxidantes da albumina nitroxidada foram avaliadas pelo teste de hemólise de hemácias induzida por radicais livres. Marcadores de oxidação de proteínas como carbonila, tiol, ditirosina e hemólise de hemácias foram avaliados em soros de pacientes com AR. A ligação de autoanticorpos em soros de AR (n=50) com albumina nitroxidada foi estudada por ligação direta, ELISA de inibição e ensaio de gel de mudança de mobilidade eletroforética. Resultados: A albumina nitroxidada indicou a geração de nitrotirosina, nitrotriptofano, carbonila, ditirosina e redução na fluorescência de tirosina e triptofano e α-helicidade. As intensidades de emissão de fluorescência da tioflavina T e do vermelho Congo aumentaram após a ligação com a albumina nitroxidada. Além disso, as estruturas secundárias e terciárias da albumina nitroxidada foram alteradas, conforme evidenciado por ATR-FTIR, CD de UV distante e próximo. Autoanticorpos em soros de AR (ou IgG purificada de soros) mostraram ligação aumentada com a albumina nitroxidada, conforme determinado por ligação direta e ELISA de inibição. Carbonilas de proteína, ditirosina e hemólise de hemácias foram significativamente altas, mas o tiol foi significativamente baixo em soros de AR em comparação ao controle pareado por idade e sexo. Conclusão: O peroxinitrito disponível endogenamente pode nitrar e oxidar a albumina, levando à nitração/oxidação de proteínas e subsequente formação de ligações cruzadas, agregados e albumina nitroxidada imunogênica. Portanto, a albumina nitroxidada pode ser um gatilho potencial para autoanticorpos em pacientes com AR.