Espectrometria de Massa e Técnicas de Purificação
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Abstrato

Revalidação de novo método LCMS/MS altamente sensível e simples para estimativa de roitukina e sua aplicação em ADME/farmacocinética pré-clínica

Amarinder Singh, Priya Wazir, Pankaj Chibber, Nitika Kapoor, Amit Kumar, Utpal Nandi, Sumit G Gandhi, Surjeet Singh, Manoj Kumar Tikoo, Ram Vishwakarma e Gurdarshan Singh

O objetivo da pesquisa foi desenvolver um método simples, rápido, preciso, reprodutível e sensível de cromatografia líquida-espectrometria de massas em tandem (LC-MS/MS) para determinação de Rohitukine, um alcaloide cromona no plasma. A separação cromatográfica foi obtida com coluna RP18e Chromolith de alta resolução (100 × 4,6 mm, 2 μm) empregando uma composição isocrática de solvente orgânico acetonitrila com 0,1% (v/v) de ácido fórmico (80:20, %v/v) a uma vazão de 0,5 mL/min. Espectrometria de massa triplo quadrupolo com técnica de ionização por eletrospray positiva (ESI) operando em monitoramento de múltiplas reações usada para estimar transições iônicas MS/MS como 306,05>245,10 e 306,05>231,05 para Rohitukine e 330,30>97,0 para IS. O método simples de precipitado de proteína de etapa única foi usado para preparação da amostra. O método foi validado para especificidade, linearidade, exatidão, precisão, recuperação, efeito de matriz e estabilidade de acordo com as diretrizes do FDA. A linearidade do analito foi adquirida em toda a faixa de concentração de 0,1 ng/mL a 1000 ng/mL no plasma de camundongos. O estudo farmacocinético foi realizado em camundongos BALB/c fêmeas por via oral (20 mg/kg) e intravenosa (2 mg/kg), onde a biodisponibilidade oral de Rohitukine obtida foi de 84%. O método bioanalítico foi usado com sucesso para determinação do estudo de ligação de proteínas plasmáticas, permeabilidade e estabilidade microssomal em microssomas de fígado de camundongos, ratos e humanos.