Jornal de Imunologia Clínica e Celular
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Abstrato

Cross-Matching baseado em fase sólida usando a plataforma Luminex para aloenxerto de órgãos sólidos: mais regressão do que progresso em comparação ao procedimento precursor baseado em ELISA

Daniela Bau, Gary Sawers, Anja Wahle, Wolfgang Altermann e Gerald Schlaf

Anticorpos direcionados contra antígenos HLA de um dado doador representam a causa mais proeminente para rejeições hiperagudas e agudas. Para selecionar receptores sem anticorpos específicos do doador, a prova cruzada de citotoxicidade dependente do complemento (CDC-) foi estabelecida pela primeira vez, representando o procedimento padrão até o presente. Seu resultado negativo pré-transplante é atualmente considerado o requisito mais importante para uma sobrevivência bem-sucedida do enxerto renal de curto prazo. Como um ensaio funcional, no entanto, depende fortemente da disponibilidade de linfócitos doadores isolados e, em particular, de sua vitalidade. Além disso, durante os últimos dez anos, várias desvantagens do procedimento baseado em CDC têm sido cada vez mais discutidas com relação à alta suscetibilidade deste ensaio a fatores disruptivos que frequentemente levam a resultados falso-positivos. Neste contexto, várias doenças autoimunes, especialmente do tipo complexo imune (tipo III) ou tratamento farmacológico de um dado receptor, demonstraram levar a resultados "falso-positivos" inesperados da prova cruzada de CDC. Como alternativas metódicas para a correspondência cruzada específica de anticorpos anti-HLA, dois procedimentos baseados em ELISA i) o Sistema de Monitoramento de Anticorpos (AMS-) ELISA e ii) o AbCross-ELISA foram estabelecidos em nosso laboratório de tipagem de tecidos e aqueles de alguns outros grupos. Ambos os sistemas, no entanto, foram descontinuados por meros motivos comerciais nos anos de 2013 e 2016, respectivamente. Usando o mesmo conjunto de anticorpos diagnósticos, o AMS-ELISA, agora denominado Donor-Specific Antibodies/DSA, foi posteriormente fabricado novamente como uma matriz baseada em microesferas usando a plataforma Luminex. Com o objetivo de estabelecer o ensaio DSA como o único sistema de correspondência cruzada baseado em fase sólida restante disponível comercialmente, este procedimento foi sistematicamente avaliado em nosso laboratório. Primariamente, mas não exclusivamente, com base nas desvantagens do software de avaliação, no entanto, 69 (32,5%) dos resultados de crossmatch virtualmente definidos (n = 212 especificações independentes de anti-HLA classe I e II e seus ensaios DSA correspondentes, respectivamente) foram classificados como divergentes usando o ensaio DSA, enquanto apenas 143 resultados (67,5%) foram classificados como concordantes pelo software deste ensaio. Referindo-se à coorte escolhida de receptores (n = 106), não menos que 62 (58,4%) deles são caracterizados por descobertas que não são suportadas pelo crossmatch virtual. Aqui fornecemos evidências de que, por várias razões, os resultados fornecidos pelo ensaio DSA, em contraste com aqueles do AMS-ELISA como seu sistema precursor, têm que ser criticamente desafiados. Concluímos, portanto, que modificações são urgentemente necessárias para serem introduzidas pelo fabricante a fim de levar novamente a um sistema de validade suficiente utilizável para diagnósticos de rotina de qualquer laboratório.