Jornal de Imunologia Clínica e Celular
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Abstrato

STAT1 é constitutivamente ativado na linha de condrócitos humanos juvenis imortalizados T/C28a2 e estimulado por IL-6 mais IL-6R solúvel

Evan C Meszaros e Charles J Malemud

Condrócitos humanos jovens imortalizados T/C28a2 foram empregados para determinar a extensão em que a ativação de Transdutores de Sinal e Ativadores de Transcrição-1 (STAT1) ocorreu em resposta à interleucina-6 humana recombinante (rhIL-6) ou rhIL-6 em combinação com o receptor solúvel de IL-6 (sIL-6R). Duas formas de STAT1, STAT1A e STAT1B, foram identificadas em SDS-PAGE e western blotting com anticorpo anti-STAT1. O western blotting revelou que STAT1 foi constitutivamente fosforilado (p-STAT1). Embora a incubação de condrócitos T/C28a2 com rhIL-6 (50 ng/ml) tenha aumentado p-STAT1A em Δ=22,3% após 30 min, essa diferença percentual não atingiu significância pela análise qui-quadrado. Da mesma forma, nenhum efeito de rhIL-6 (Δ=+10,7%) em p-STAT1B foi observado em 30 min. Em contraste, embora a combinação de rhIL-6 mais sIL-6R não tenha tido efeito em p-STAT1A, rhIL-6 mais sIL-6R aumentou p-STAT1B em Δ=73,3% (p<0,0001) após 30 min em comparação com o grupo controle e em Δ=56,7% (p<0,0001) em comparação com rhIL-6 sozinho. Janex-1, um inibidor específico da Janus quinase-3 (100 μM) reduziu parcialmente o efeito de rhIL-6 em p-STAT1B em Δ=27,7% (p<0,05). Os resultados deste estudo mostraram que STAT1A/STAT1B foi constitutivamente ativado em condrócitos T/C28a2. Embora rhIL-6 tenha aumentado p-STAT1B em pequena extensão, a combinação de rhIL-6 mais sIL-6R foi muito mais eficaz em estimular a fosforilação de STAT1B em comparação aos controles ou rhIL-6 sozinho. Esses dados apoiam a probabilidade de que, embora a ativação mediada por JAK3 de STAT1 em condrócitos T/C28a2 possa envolver a via IL-6/IL-6R/gp130, esses resultados indicaram que a ativação de STAT1 em resposta a IL-6 envolveu preferencialmente a trans-sinalização de IL-6 via sIL-6R.