Andrologia-acesso aberto
Acesso livre

Abstrato

Margaret Jones

Histórico: Receptores nucleares (NRs) e receptores acoplados à proteína G (GPCRs) são duas vias de transdução de sinal principais distintas, mas intimamente inter-reguladas, de células eucarióticas. O receptor de andrógeno (AR) e a proteína de ligação ao elemento responsivo ao AMPc (CREB) são fatores de transcrição (TF) clássicos das vias de NRs e GPCRs, respectivamente. Embora os conhecimentos emergentes sugiram interações funcionais entre os dois TFs, falta um estudo mecanístico detalhado. Métodos: Translocações subcelulares dinâmicas de AR e CREB em resposta à ativação de uma ou ambas as vias de sinal foram estudadas em células vivas usando microscopia confocal a laser. As atividades transcricionais dos dois TFs foram avaliadas pelas atividades de promotores alvo cognatos. Resultados: AR e CREB residiam no citoplasma e no núcleo, respectivamente, ambos de maneira difusa, e ambos eram transcricionalmente silenciosos, na ausência de ativação de andrógeno ou PKA. AR translocado para focos subnucleares e tornou-se transcricionalmente ativo na presença de Diidrotestosterona (DHT). CREB passou por formação de focos subnucleares semelhantes e ativação transcricional na presença de forskolina estimuladora de PKA (FSK). Em um subconjunto de células onde AR residia difusamente no núcleo na ausência de DHT, FSK translocou AR para focos subnucleares e tornou AR transcricionalmente ativo. DHT translocou AR e CREB para cerca de 300 focos subnucleares onde os dois TFs co-localizaram. Este processo levou à ativação transcricional de AR, mas não de CREB. A estimulação de células com FSK e DHT não alterou os focos de co-localização AR-CREB, embora a atividade transcricional de AR mediada por DHT tenha sido aumentada, enquanto a atividade transcricional de CREB induzida por FSK foi reduzida. Conclusão: AR ligado a andrógeno e CREB ativado por PKA são translocados para os mesmos focos subnucleares onde os dois TFs são submetidos a regulações cruzadas mútuas e diferenciais, de modo que CREB aumenta a transativação de AR mediada por DHT, enquanto AR ligado a ligante suprime a transativação de CREB induzida por PKA. Palavras-chave: Receptor de andrógeno; CREB; Regulação da transcrição; Localização subcelular; Células vivas. Abreviações: AR: Receptor de andrógeno; ARE: Elemento responsivo a andrógeno; CBP: proteína de ligação a CREB; CFP: Proteína fluorescente ciano; CRE: Elemento responsivo a AMPc; CREB: Proteína de ligação a elemento responsivo a AMPc; DHT: di-hidrotestosterona; ER: Receptor de estrogênio; FSK: forscolina; GFP: Proteína fluorescente verde; GPCR: Receptor acoplado à proteína G; GR: Receptor de glicocorticoide; HSP: Proteína de choque térmico; MMTV: vírus tumoral de mamíferos de camundongo; NLS: sinal de localização nuclear; NR: receptor nuclear; SF1: fator esteroidogênico 1; SRC1: coativador do receptor esteroide 1; TF: fator de transcrição; TIF 2: fator intermediário transcricional 2.