Jornal de Ciência e Terapia Celular
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Abstrato

A sinalização TCR via ZAP-70 induzida pela estimulação CD3 é mais ativa em condições ácidas

Xin Wang, Kenta Hatatani, Yirong Sun, Toshihiko Fukamachi, Hiromi Saito e Hiroshi Kobayashi

Embora os valores de pH do sangue e dos tecidos sejam geralmente mantidos numa gama estreita de cerca de 7,4, algumas áreas doentes, como ninhos de cancro, locais inflamatórios e áreas de enfarte, são acidificadas. No presente estudo, o efeito do pH ácido extracelular na sinalização do TCR foi examinado com células Jurkat da linha de células T de leucemia aguda humana porque a infiltração de células T é frequentemente observada em áreas ácidas doentes. Os níveis de fosforilação de CD3-ξ ZAP-70 e PLC-γ1 induzidos por OKT-3, anticorpo anti-CD3, foram mais elevados a pH 6,3 do que a pH 7,6. A ativação de PLC-γ1 induzida por OKT-3 foi ainda aumentada pela coestimulação com CD28.6, anticorpo anti-CD28, a pH 7,6, mas não a pH 6,3. O nível de iões de cálcio livres citosólicos foi aumentado para um nível mais elevado pela adição de OKT-3 a pH 6,3, em comparação com o da adição de OKT-3 mais CD28.6 a pH 7,6. A adição adicional de CD28.6 diminuiu o nível de iões de cálcio livres citosólicos induzidos pelo OKT-3 a pH 6,3. A mobilização de Ca2+ foi fortemente inibida pelo BTP2, um potente inibidor dos canais de Ca2+ na membrana plasmática, a pH 7,6, enquanto a inibição foi fraca a pH 6,3. A mobilização de Ca2+ a pH 6,3 foi dependente de ZAP-70 e LAT, mas não de SLP-76. A ativação de ERK e p38 aumentou à medida que o pH diminuiu. Não foi observada ativação de ERK2 na presença de OKT-3 no mutante Jurkat deficiente em ZAP-70 a pH 6,3, enquanto que ERK1 foi ativado pela adição
de OKT-3 neste mutante. A expressão de IL-2 não foi induzida por OKT-3 ou OKT-3 mais CD28.6 a pH 6,3. Estes resultados sugerem que a sinalização do TCR iniciada pela estimulação do CD3 é mais ativa a pH ácido nas células Jurkat e a sua via é diferente em partes sob diferentes condições de pH.