Jornal da Leucemia
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Abstrato

Utilidade da Análise de Mutação Multiplex no Diagnóstico da Leucemia Mielomonocítica Crônica

Daphne Ang, Guang Fan, Elie Traer, Tibor Kovacsovics, Nicky Leeborg, Marc Loriaux, Andrea Warrick, Carol Beadling, Susan Olson, Ken Gatter, Rita M. Braziel, Christopher L. Corless, Richard Press e Jennifer Dunlap

Leucemia mielomonocítica crônica (LMMC) é uma neoplasia mieloide caracterizada por características mieloproliferativas e mielodisplásicas, além de monocitose sanguínea periférica persistente (>1×109/L) que é necessária para o diagnóstico. Anormalidades citogenéticas clonais são identificadas em apenas 20%-30% dos pacientes com LMMC e pode ser desafiador diagnosticamente excluir monocitose reativa em alguns casos. Várias mutações genéticas foram recentemente implicadas na patogênese da LMMC que envolvem vias de sinalização da tirosina quinase, regulação transcricional, metabolismo, splicing e mecanismos regulatórios epigenéticos. Este estudo foi projetado para avaliar mutações recorrentes na LMMC usando uma abordagem baseada em espectrometria de massa multiplex e para determinar a utilidade da triagem de mutações na LMMC, particularmente em casos citogeneticamente normais. O banco de dados de patologia cirúrgica da Oregon Health and Science University (OHSU) foi pesquisado de 2010 a 2012 para identificar casos consecutivos de LMMC que atendessem aos critérios diagnósticos da OMS. Análises citogenéticas e estudos moleculares foram realizados em espécimes de medula óssea diagnóstica. Extratos de DNA foram rastreados para mutações pontuais usando um painel de PCR multiplex com leitura de espectroscopia de massa que cobre 370 mutações pontuais em 31 genes associados à leucemia. Dos 48 casos de CMML identificados nos arquivos da OHSU, 43 tinham estudos citogenéticos disponíveis. Destes, 10/43 casos (23%) tinham anormalidades citogenéticas, incluindo: trissomia 8 (n=4), trissomia 21 (n=2), deleção 7q (n=1), del 13q (n=1), cariótipo complexo (n=1) e t (3;3) (n=1). Dos casos com dados citogenéticos, 22 tinham DNA disponível para análise de mutação, e 11 desses casos genotipados (50%) tinham mutações detectáveis ​​nos seguintes genes: CBL (n=3), CKIT, JAK2, KRAS (n=2), NRAS (n=3) e NPM1. Nove casos com mutações detectadas tinham citogenética normal. Anormalidades moleculares e citogenéticas concomitantes foram vistas em 2 casos: um caso com trissomia 8 e CBL C384Y e um caso com trissomia 21 e JAK2 V617F. Nos 22 casos com dados citogenéticos e moleculares disponíveis, a realização de testes moleculares multiplex de rotina, além de estudos citogenéticos em pacientes com CMML, aumentou a detecção de anormalidades genéticas de 23% (5/22) para 64% (14/22), com mutações CBL e RAS frequentes em nossa coorte. Este estudo confirma que mutações genéticas são eventos comuns na LMMC, e a análise de mutações multiplex pode ser aplicada no ambiente clínico para auxiliar no diagnóstico e pode identificar mutações acionáveis ​​para terapia direcionada.