Jornal de Ensaios Clínicos
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Abstrato

Validação de genes de referência para análise da expressão génica no desenvolvimento de frutos de Vaccinium bracteatum Thunb utilizando PCR quantitativo em tempo real

Feng He*, Liangxian Gui, Yan Zhang, Bo Zhu, Xiaoping Zhang, Min Shen, Fengying Wan, Lu Yang, Jiaxin Xiao*

Enquadramento: Vaccinium bracteatum Thunb. (VBT) está amplamente distribuído nas áreas montanhosas do leste e sul da China. As folhas de VBT têm um grande valor médico e podem ser utilizadas para tingir arroz para produzir “Wumifan”. Os seus frutos também contêm nutrientes ricos. No entanto, tem havido uma atenção limitada à exploração do conteúdo molecular do VBT. Anteriormente, realizámos RNA-seq em três frutos VBT típicos que estavam em vários estados de maturação, embora um gene de referência fiável tenha sido perdido na validação.

Resultados: Neste estudo, selecionámos dez genes candidatos de referência com base em estudos anteriores e análises transcriptómicas. Posteriormente, estes genes foram avaliados utilizando uma combinação de métodos, incluindo o geNorm, NormFinder e Bestkeeper, com uma avaliação de classificação abrangente. Como resultado, verificámos que os genes actina2, NADH e ADK apresentam uma elevada fiabilidade para analisar os níveis de expressão dos genes envolvidos no desenvolvimento dos frutos. Além disso, os níveis de transcrição de 15° da análise transcriptómica foram avaliados utilizando o NADH como gene de referência, e os dados de RT-qPCR foram altamente consistentes com os dados transcriptómicos.

Conclusões: Estes resultados fornecem um gene de referência fiável para estudos adicionais da expressão genética, o que será benéfico para explorar de forma abrangente o VBT.