Engenharia Enzimática
Acesso livre

Abstrato

Avaliação e Caracterização da Produção de Protease por Bacillus Sp. Induzida por UV-Mutagenesis

Neha Karn e Santosh Kumar Karn

 Mutantes fenotípicos de Bacillus sp. foram desenvolvidos por irradiação UV para testar sua capacidade de aumentar a atividade da protease. Entre os cinco mutantes, RS1 foi considerado mais eficiente em comparação a outros mutantes e à cepa selvagem. A protease máxima foi obtida do extrato celular da cepa Bacillus sp. RS1, que foi usada para purificação e caracterização. O filtrado da cultura de Bacillus sp. RS1 foi purificado com precipitação de sulfato de amônio; o sobrenadante filtrado da cultura mostrou a maior atividade específica de protease e continha 86% da porcentagem geral de protease da cultura. Uma precipitação de sulfato de amônio entre 40-70% foi usada para purificar a protease e resultou em um aumento de 20 vezes na atividade específica em comparação ao sobrenadante não concentrado. A purificação da coluna resultou em um aumento de 44 vezes na atividade específica em comparação ao sobrenadante não concentrado de Bacillus sp. RS1. Com base nos resultados obtidos, a cepa mutante RS1 foi considerada mais adequada para a purificação da enzima protease. A enzima protease purificada teve uma atividade máxima em pH 7,0 com tampão fosfato e o tempo ótimo de incubação foi de 24 h. A protease isolada de RS1 é estável em pH 8,5 e temperatura de 60°C, além disso, essa enzima pode ser explorada comercialmente.