Engenharia Enzimática
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Abstrato

Oligomerização catalisada por papaína em meio orgânico aquoso monofásico - Síntese e caracterização de oligômeros de aminoácidos neutros e polares

Srinivasan SK, Kapila S, Daniel F e Nam 

A síntese de oligopeptídeos é geralmente realizada em meios de reação aquosos ou bifásicos; o uso de meios de reação monofásicos é bastante limitado. Neste estudo, homo-oligopeptídeos de lisina (Lys), glicina (Gly), metionina (Met) e tirosina (Tyr) foram sintetizados por meio de reação catalisada por papaína em sistemas monofásicos consistindo de acetonitrila/água. As condições de reação foram otimizadas para a formação de ligação peptídica e para minimizar a desnaturação enzimática. Esses meios são especialmente atraentes porque podem minimizar a hidrólise secundária e reversa do complexo acila e do oligopeptídeo, respectivamente. Os oligopeptídeos sintetizados foram purificados e caracterizados por cromatografia líquida de fase reversa (RPLC) e espectrometria de massa de ionização por eletrospray (ESI-MS). Os rendimentos de oligopeptídeos foram de aproximadamente 80% para todos os aminoácidos. A especificidade estereoscópica da papaína em meios acetonitrila/água também foi investigada. Os enantiômeros separados de metionina foram caracterizados usando Cromatografia Líquida de Alta Pressão Quiral (HPLC). Os resultados indicam que a especificidade L da papaína é mantida em meios monofásicos.