Jornal de Probióticos e Saúde
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Abstrato

Sondas TaqMan® específicas para a identificação e quantificação de lactobacilos em produtos farmacêuticos

Herbel SR, Von Nickisch-Rosenegk M, Kuhn M, Murugaiyan J, Wieler LH e Guenther S

Estão disponíveis no mercado vários produtos probióticos contendo espécies do género Lactobacillus. Normalmente, são produtos lácteos fermentados, como iogurtes e vegetais. Além disso, as bactérias probióticas são utilizadas em produtos farmacêuticos, que também se acredita terem efeitos benéficos na saúde humana. As formas de aplicação farmacêutica comuns para fornecer probióticos são comprimidos, gotas ou formulações granuladas para administração oral. Devem conter números suficientes de probióticos viáveis ​​para garantir benefícios ativos para a saúde. Apesar da transferência bem sucedida de lactobacilos, os seus métodos tradicionais de identificação de espécies são demorados e trabalhosos e não permitem a quantificação das espécies. Assim sendo, o objetivo do presente trabalho foi desenvolver um método rápido e independente de cultura de identificação e quantificação para duas espécies comercialmente importantes do género Lactobacillus (L. acidophilus e L. reuteri). Utilizámos um ensaio de PCR em tempo real TaqMan® baseado na região da proteína de choque térmico GroEL. Assim sendo, foram desenvolvidos iniciadores universais para lactobacilos e iniciadores TaqMan® específicos para espécies. O ensaio permitiu uma deteção inequívoca específica da espécie de L. acidophilus e L. reuteri em culturas bacterianas, bem como diretamente em comprimidos. Utilizando este ensaio, conseguimos detetar estirpes de lactobacilos a um nível de 104 ufc/ml, que é um limite de deteção suficiente, uma vez que os produtos farmacêuticos comerciais contêm geralmente 108–1010 ufc/comprimido de estirpes probióticas.