Engenharia Enzimática
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Abstrato

Eficácia terapêutica da L-metioninase como agente anticâncer: análise in silico versus in vivo

Bhawana Kharayat, Priyanka Singh*

A L-metioninase tem aplicação significativa como droga anticâncer quimioterápica no setor farmacêutico. A atividade catalítica da L-metioninase esgotou o fornecimento exógeno de L-metionina ao interromper o crescimento de células cancerígenas dependentes de metionina. Neste estudo, a L-metioninase foi purificada do caldo fermentado da nova bactéria isoladano Pseudomonas stutzeri MTCC 101 com peso molecular (45 kDa), constante de Michaelis (K _m = 36,5 mM) e atividade máxima (V _máx = 500 μmol/ min/mg de proteína). Esta enzima foi resolvida em 291 sequências de peptídeos após espectroscopia MALDI-TOF/MS. Estudos de simulação e encaixe molecular como abordagem in silico confirmaram sua maior camada de ligação para substratos L-treonina e L-metionina. O teste de especificidade do substrato confirmou sua atividade máxima para o substrato de aminoácido específico L-metionina. A alta estabilidade conformacional de seu modelo tridimensional com substrato L-metionina foi validada pela realização de análise in vitro contra linhas de células cancerígenas. Os experimentos foram validados pela realização de análise in vitro desta enzima contra o crescimento de linhas de células cancerígenas. Esta enzima purificada mostrou bom efeito inibitório contra câncer hepatocelular (Hep-G2) e carcinoma de pulmão humano (A549) com valor de IC ₅₀ de 56 μg/ml e 53 μg/ml, respectivamente. Esta enzima poderia ser eficazmente usada para a formulação de um medicamento anticâncer terapêutico no futuro.