Journal of Food: Microbiologia, Segurança e Higiene
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Abstrato

Validando a Eficiência de um PCR Simplex e qPCR Quantitativo SYBR Green para a Identificação de Salmonella spp. ADN

Andrey Carlos do Sacramento de Oliveira, Matheus C Rosa, Jéssica L Borchardt, Yasmine A Menegon, Milena Martins Andrade Fernandes, Gabrielle Virgínia Ferreira Cardoso, Andréia Silva da Silva, Roberta S Sousa, Josyane Brasil da Silva, Fábio FL Leite, Talita Bandeira Roos and Carina Martins de Moraes

Este estudo teve como objetivo realizar uma validação comparativa da eficiência do qPCR quantitativo SYBR Green e PCR simplex na identificação de Salmonella spp. ADN. Para tal, as amostras de ADN de Salmonella typhimurium foram diluídas até 10-5 em duplicado. Os resultados mostraram que os mesmos primers foram eficazes tanto para a PCR simplex como para a qPCR. Foi possível detetar a espécie bovina até uma diluição de 10-1 utilizando PCR simplex. Para todas as diluições foi possível obter amplificação qPCR com um valor mínimo de Ct de 15,13 para a diluição 10-1 para Salmonella spp. De seguida, os amplicons qPCR SYBR Green foram separados através de eletroforese em gel de agarose para confirmação do tamanho do fragmento amplificado. A superioridade do qPCR sobre o PCR multiplex foi validada em termos de sensibilidade, mesmo com a utilização do corante SYBR Green, sugerindo a possível utilização para controlo de qualidade em alimentos.