Química Orgânica: Pesquisa Atual
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Abstrato

Síntese in vitro de dez amidos pela enzima sintase do amido de batata e enzima de ramificação do amido, fornecendo diferentes proporções de amilopectina e amilose

Mukerjea R, Leaves RL, Gray AN e Robyt JF

Os objetivos deste estudo foram a utilização de duas enzimas altamente purificadas, a Amido-Sintetase de Batata (SS) e a Enzima de Ramificação do Amido (SBE) para obter in vitro a síntese de dez amidos, com diferentes proporções de amilopectina e amilose. A amilose foi sintetizada pela primeira vez pela reação de SS com ADP [14C] Glc para dar dez amiloses idênticas; a amilopectina foi então sintetizada por ação do SBE para dar dez amidos com diferentes quantidades de amilopectina. Duas das 14C-amiloses reagiram com 1,0 mUI de Enzima de Ramificação do Amido (SBE) purificada durante 75 e 130 segundos, respetivamente. Numa segunda síntese, 3 das amiloses foram autoclavadas e reagiram com 1,0 mUI durante 15, 45 e 75 segundos. Na terceira síntese, 5 amiloses reagiram com diferentes quantidades de SBE de 0,50 a 0,01 mUI durante 130 segundos cada. Os 10 amidos sintetizados foram separados em frações amilopectina e amilose. As proporções de amilopectina e amilose variaram entre 99,9% de amilopectina e 0,1% de amilose a 10% de amilopectina e 90% de amilose. Os resultados mostram que foram sintetizados 10 amidos diferentes, utilizando apenas duas enzimas, a SS e a SBE. Nenhum primer foi envolvido. O glicogénio e as enzimas desramificadoras também não estavam envolvidos.