Engenharia Enzimática
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Abstrato

Proteínas tirosina fosfatases de baixo peso molecular controladas e produzidas por antibióticos em Streptomyces coelicolor A3(2)

Sujata Vijay Sohoni, Sarah Lieder, Prashant Bapat, Ivan Mijakovic e Anna Eliasson Lantz

Streptomyces coelicolor A3(2) possui uma proteína tirosina fosfatase de baixo peso molecular (LMW-PTP), PtpA, que afeta a produção de undecilprodigionsina (RED) e actinorrodina (ACT). Neste estudo, identificamos outra chamada LMW-PTP sco3700. A atividade da tirosina fosfatase do Sco3700 purificado foi exigida usando para-nitrofenil fosfato e a proteína tirosina fosforilada PtkA de Bacillus subtilis como substratos. O pH ótimo para a atividade da fosfatase do Sco3700 foi 6,8, e o KM para pNPP foi 14,3 mM em comparação com o pH 6,0 e KM 0,75 mM para PtpA. O potencial do Sco3700 para participar, juntamente com o PtpA, na regulação da produção de antibióticos de S. coelicolor foi investigado. Portanto, as cepas S. coelicolor A3(2) com superexpressão de ptpA e sco3700 foram construídas e definidas para crescimento, RED e produção de ACT. Observamos um aumento na produtividade volumétrica de ACT na cepa de superexpressão de ptpA. Além disso, um início significativamente mais precoce da produção de ACT foi observado quando ptpA foi superexpresso. A superexpressão de Sco3700 teve um efeito pleiotrópico na célula, e a cepa exibiu menores produtividades e concentrações finais de antibióticos. Concluímos que Sco3700 é de fato uma tirosina fosfatase, e contribui para a regulação da produção de antibióticos em S. coelicolor afetando o momento do início da produção de antibióticos.